Expression of truncated NSP2 protein of porcine reproduction and respiratory syndrome virus in E.coli and the development of monoclonal antibodies against NSP2 protein
猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP2的原核表达及其单克隆抗体的研制

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株截短修饰的NSP2蛋白基因(tNSP2),克隆于pGEX-6P-1载体中,转化大肠杆菌后用IPTG诱导表达.Western blot结果表明,融合表达的GST-tNSP2蛋白能被PRRSV阳性血清特异性识别,大小约50kDa.经GST柱提取纯化蛋白GST-tNSP2,免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,获得2株能稳定分泌抗NSP2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为2B5、3H3,亚型鉴定结果均为IgG1型,其轻链均为κ链.间接免疫荧光试验证明,2B5和3H3均能与PRRSV S1毒株产生特异性反应,而不能与SY0608毒株反应,从而为PRRSV分离株的鉴定及NSP2功能研究奠定了重要基础.