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中国生物工程杂志 2007
Analysis of the promoter derived tissue specific activity about banana bunchy top virus DNA2 and DNA3 components
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Abstract:
香蕉束顶病毒(BBTV)基因组至少由6个大小约为1.0~1.1kb的单链环状DNA组分所组成,每一个DNA组分包含编码区与非编码区。在前人的研究基础上进一步了解BBTV DNA组分启动子的功能。首先根据BBTV海南分离物的全序列,通过常规PCR扩增出长为540bp的BBTV DNA3组分启动子序列BV3.1,同时通过重叠PCR扩增出646bp的DNA2与DNA3组分非编码区拼接的重组启动子序列BV23,分别替代pBI121 35S启动子序列与gus基因进行融合,构建植物表达载体pBIBV3.1、pBIBV23。农杆菌介导转化获得的pBIBV3.1转基因烟草经GUS化学组织染色后,在其叶片的叶脉处检测到微弱的GUS活性,证实了DNA3组分的韧皮部特异表达活性;而pBIBV23转基因烟草,其叶片经GUS组织化学染色后,在叶肉、叶缘及一些叶脉上检测到弱GUS活性,这表明由BV23驱动的gus基因在烟草中类似于组成型表达,则DNA2组分转录方式可能有异于DNA3组分。