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遗传 2008
Cloning and optimizing prokaryotic induced expression conditions of prolactin in White Goose
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Abstract:
运用RT-PCR方法,从白鹅脑垂体总RNA中扩增得到了催乳素(Prolactin,PRL)基因编码区序列cDNA,并将其克隆到pMD18-T载体上。DNA序列分析表明,PRL cDNA包括终止密码子在内的长度为690 bp,编码230个氨基酸残基的蛋白质,与皖西白鹅的有所差异,二者碱基同源性在99.57%,氨基酸同源性达99.56%。将PRL基因编码区序列cDNA定向克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建表达质粒pET-32a(+)-PRL。该质粒的BL21(DE3)转化菌在IPTG的诱导下可表达PRL基因融合蛋白,IPTG终浓度1 mmol/L,37℃,诱导4 h表达量最高,表达量约占菌体总蛋白的28.96%。