Cloning and Expression of Endoglucanase Gene of Xanthomonase campestris in Escherichia coli
野油菜黄单胞菌S-152内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达 Cloning and Expression of Endoglucanase Gene of Xanthomonasecampestris in Escherichia coli

以质粒ｐＵＣ９为载体，大肠杆菌ＪＭ８３为宿主菌，用鸟枪法克隆到纤维素降解细菌野油菜黄单胞菌Ｓ－１５２的内切葡聚糖酶（ＣＭＣａｓｅ）基因，克隆到的ＣＭＣａｓｅ基因位于２７ｋｂ的ＨｉｎｄⅢ片段上，该重组质粒命名为ｐＵＣ９Ｈ－１。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析结果显示所克隆到的内切葡聚糖酶基因与野油菜黄单胞菌染色体ＤＮＡ有亲和性。对克隆株的酶学性质分析表明，其ＣＭＣａｓｅ活力为０３１０μｍｏｌＧｌｕ／ｍｇ蛋白·分钟，最适作用ｐＨ为６４，最适作用温度为５５℃。