Purification of recombinant H-NS protein of Yersinia pestis and characterization of its DNA-binding activity
鼠疫菌H-NS蛋白的表达与纯化及其DNA结合活性

摘要：【目的】利用大肠杆菌BL21λDE3的表达系统，表达出有活性的鼠疫耶尔森氏菌（以下简称鼠疫菌）调控子蛋白H-NS，为进一步研究H-NS的转录调控奠定基础。【方法】 PCR扩增鼠疫菌201株hns基因的编码区，将其直接克隆入pET28a质粒中，再将pET28a-hns重组质粒转入大肠杆菌BL21λDE3菌株中，所得菌株经IPTG诱导后能表达出鼠疫菌His-H-NS蛋白；通过体外的凝胶迁移实验（EMSA）和DNaseⅠ足迹实验对His-H-NS蛋白与DNA的结合活性进行分析。【结果】成功表达出有活性的鼠疫菌His-H-NS蛋白，该蛋白对鼠疫菌pH6抗原基因（psaA、psaE）及rovA基因均有结合活性。【结论】鼠疫菌His-H-NS具有DNA结合活性，说明H-NS能调控鼠疫菌基因的转录。