|
|
微生物学通报 2011
毛霉△6-脂肪酸脱氢酶随机突变文库的构建与分析Keywords: △6-脱氢酶,易错PCR,随机突变,毛霉,γ-亚麻酸 Abstract: 毛霉Mucor sp. EIM-10 △6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶。为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响, 本研究利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mcd6)进行随机突变, 将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体PYMD6PMCD6连接, 获得随机突变质粒PYTBMCD6, 转化酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae, 构建了原始库容为4.6×104 CFU的△6-脂肪酸脱氢酶的随机突变表达文库。随机突变表达文库的构建与分析为定点
|
