Effects of Different Methanol Feeding Strategy on Hirudin Production in High-density Fermentation by Recombinant Pichia pastoris
不同甲醇流加策略对重组毕赤酵母高密度发酵生产水蛭素的影响

考察了不同甲醇流加策略对毕赤酵母高密度发酵生产水蛭素的影响。溶氧控制法不能有效地防止甲醇的过量流加。气相色谱离线检测法虽然防止了甲醇流加过量，但甲醇浓度的波动较大。利用甲醇传感器在线检测控制甲醇的流加可维持较恒定的甲醇浓度。在流加甲醇的同时，以限制性速率流加甘油可以增加表达期间的能量供应，提高产物的表达量。经优化后，采用甲醇甘油混合流加时细胞干重达到162g/L，水蛭素活性达到24×104ATU/mL，即1.7 g/L。 