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生物工程学报 2002
Construction of Recipient Strain of Expression-secret ion System in Filamentous Fungi
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Abstract:
黑曲霉糖化酶高产菌株T21经紫外诱变后, 通过酪蛋白平板和蛋白酶活性测定筛选出胞外酸性蛋白酶活力仅为原株076%的菌株A.nigerT21-201，其生长特性和产糖化酶活力与原株基本一致。利用原生质体PEG法将含有报告基因vhb的表达分泌质粒Pgt10-vhb通过与选择标记质粒的共转化导入此蛋白酶部分缺陷株及其原株T21，检测在蛋白酶缺陷株Aspergillus niger T21-201 和原株T21中VHb的分泌表达，结果表明在A.nigerT21-201中VHb表达水平显著高于原株，但Northern blot却显示在两菌株中vnb基因的转录水平近似，由此证明酸性蛋白酶缺陷对保护外源蛋白产生了显著效果。
