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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
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Cloning of Polygalacturonase (PG) cDNA and Inhibition Effects of Its Antisense RNA on the Expression of PG Gene in Transgenic Tomato Plants
番茄多聚半乳糖醛酸酶cDNA的克隆及其对番茄中PG表达的反义抑制

Keywords: Polygalacturonase (PG),antisense RNA,transgenic tomato
多聚半乳糖醛酸酶(PG),反义RNA,转基因番茄

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Abstract:

通过PCR扩增获得了包含多聚半乳糖醛酸酶(PG)全部阅读框架的1.5kb cDNA,经限制酶酶谱和部分序列分析鉴定无误后,将其以反方向插入含两个增强子的35s启动子和Nos3'端之间,构建成表达PG反义RNA的双元载体,经农杆菌途径转化番茄品种“丽春”,获得了60株抗卡那霉素再生植株,经PCR检测,证明有2/3的再生植株有外源PG基因导入,成熟果实的PG粗提液的SDS—PAGE分析表明:若干株系中PG蛋白量较对照有不同程度的下降。PG活性亦同步下降,其中一个株系3#,PG酶活下降了93%。这些结果表明外源PG基因的反方向导入有效地抑制了内源PG基因的表达。

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