cDNA合成和产量计算

以信使核糖核酸(mRNA)为模板合成互补的DNA链(cDNA),并以此单链DNA合成双链cDNA的技术是基因工程中最初的和重要的环节之一。本文根据研究工作的体会介绍cDNA合成方法,产量计算,影响cDNA合成的因素和解决的方法。一、cDNA合成方法自从1970年Temin和Baltimore 发现鸡骨髓瘤病毒逆转录酶以后,以mRNA为模板合成cDNA的技术很快应用到基因工程研究中。由于大多数合成反应都以polyA-mRNA为模板,因此需要加入寡聚脱氧胸腺核苷酸作为引物。底物是四种脱氧核苷三磷酸,其中一种