%0 Journal Article
%T 平肝潜阳方含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖、迁移及DNA甲基化水平的影响
%A 万玲
%A 王东生
%A 钟广伟
%A 陈琼
%J -
%D 2016
%R 10.7661/CJIM.2016.05.0580
%X 目的观察平肝潜阳方对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells， VSMCs）增殖和迁移的抑制作用及DNA甲基化水平的影响。方法采用组织贴块法培养VSMCs，制备平肝潜阳方含药血清。将培养细胞分为正常组（原代培育的VSMCs）、模型组、叶酸组及平肝潜阳方组（下称中药组）。以AngⅡ作为诱导复制VSMCs增殖及迁移模型，在 AngⅡ诱导VSMCs培育24 h后，叶酸组加入40 μg/mL 叶酸干预48 h，中药组加入5%中药血清干预48 h。采用CCK-8（Cell Counting Kit）试剂盒绘制VSMCs生长曲线，MTT法测定VSMCs增殖活性，体外细胞划痕实验检测细胞迁移情况，以抗5-甲基胞嘧啶（5-mC）抗体进行免疫荧光检测细胞核中胞嘧啶甲基化水平；Real-time q-PCR方法检测DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferase 1，DNMT1） mRNA表达水平。 结果AngⅡ在10－6 mol/L浓度下诱导24 h后可促进VSMCs生长。与正常组比较，模型组细胞增殖活性及迁移数量明显增加，DNA甲基化水平明显降低（P<0.05， P<0.01）；与模型组比较，叶酸组及中药组VSMCs生长、细胞增殖活性及迁移数量均明显降低，DNA甲基化水平升高 （P<0.05， P<0.01）；与正常组比较，模型组VSMCs DNMT1 mRNA 表达水平降低（P<0.01）；与模型组比较，叶酸组及中药组VSMCs DNMT1 mRNA 表达明显增强（P<0.01）。结论平肝潜阳方可抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖和迁移，可导致基因组DNA高甲基化，其DNA 甲基化水平改变可能与DNMT1表达有关
%K 血管平滑肌细胞 增殖与迁移 DNA甲基化 平肝潜阳方 DNA甲基转移酶1
%U http://www.cjim.cn/zxyjhcn/zxyjhcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=2016050580&flag=1