%0 Journal Article
%T 北京棒杆菌Corynebacterium pekinense天冬氨酸激酶P184M酶动力学分析及酶学性质表征
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%D 2017
%X 目的 研究北京棒杆菌天冬氨酸激酶(aspartate kinase, AK)184位点脯氨酸(proline, P)突变为蛋氨酸(DL-methionine, M)对酶动力学及酶学性质的影响。方法 对北京棒杆菌AK家族同源序列比对, 选择出高度保守且远离底物结合位点的Pro184位点, 对其进行饱和定点突变, 成功构建突变体P184M。结果 动力学和酶学性质研究表明: P184M AK Vmax比WT(wide type)提高了5.06倍; n值为0.19, 突变体由WT的正协同性变为负协同性, 同时Km(mol/L)值增大; 突变体AK最适pH为6.5, 低于野生型最适pH 7.0; 最适反应温度28 ℃, 低于WT的30 ℃, 适宜温度区间变窄; 半衰期由WT的2.1 h降为1.2 h; 金属离子、有机溶剂和抑制剂Thr+Met、Lys+Met、Thr+Lys+Met对突变株AK均表现出激活作用。结论 突变体天冬氨酸激酶P184M的酶动力学性质和酶学性质改变显著, 为构建高产蛋氨酸菌株提供了一定的参考依据
%K 北京棒杆菌 天冬氨酸激酶 突变株 酶学性质
%U http://www.chinafoodj.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20170310001&flag=1