%0 Journal Article
%T 独行菜磷酸甲羟戊酸激酶LaPMK基因克隆、生物信息学分析及原核表达
%A 冯卫生
%A 杨方方
%A 赵乐
%A 郑晓珂
%A 马利刚
%J -
%D 2016
%R 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.17.021
%X 目的 从独行菜Lepidium apetalum中克隆萜类合成途径关键酶磷酸甲羟戊酸激酶（phosphomevalonate kinase，PMK）基因，进行序列分析和原核表达。方法 根据独行菜转录组数据中LaPMK基因序列设计特异性引物，克隆得到LaPMK基因的开放阅读框（open reading frame，ORF），构建pET32a-LaPMK原核表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中用IPTG诱导表达LaPMK融合蛋白。结果 LaPMK基因ORF全长为1 518 bp（Genbank注册号KT004541），编码505个氨基酸。生物信息学分析结果显示LaPMK蛋白没有跨膜区，不含信号肽，位于细胞质中，含有GHMP激酶家族特异的N末端和C末端的保守结构域。系统进化树结果显示LaPMK蛋白与芜菁的PMK蛋白具有92%的序列相似性，亲缘关系较近。构建pET32a-LaPMK原核表达载体，在大肠杆菌中成功表达LaPMK融合蛋白。结论 克隆了LaPMK基因，建立其稳定的原核表达体系，为LaPMK蛋白纯化、抗体的制备，进一步研究LaPMK基因在独行菜萜类合成途径中的作用奠定了基础
%K 独行菜 磷酸甲羟戊酸激酶 萜类合成 基因克隆 原核表达
%U http://www.tiprpress.com/zcy/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20161721&flag=1