%0 Journal Article %T 刺五加GPS基因克隆及表达特征与皂苷含量相关性研究 %A 冯文昭 %A 国红玉 %A 张佳桢 %A 王卓 %A 邢可心 %A 邢朝斌 %J - %D 2019 %R 10.7501/j.issn.0253-2670.2019.05.029 %X 目的 克隆刺五加香叶基焦磷酸合成酶(geranyl pyrophosphate synthase,GPS)基因的cDNA序列并分析基因序列特征、不同器官中基因表达水平及其与皂苷含量的相关性。方法 提取刺五加的RNA,逆转录为cDNA。根据转录组测序结果中编码GPS的unigene(c37362.graph_c0),设计特异性引物,经过PCR扩增GPS基因的cDNA全长。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析GPS基因在不同器官中的表达水平,并通过分光光度法检测刺五加总皂苷含量。结果 克隆得到长1 260 bp、编码419个氨基酸的刺五加GPS基因cDNA。GPS蛋白定位于线粒体内且不存在跨膜区域。GPS基因在各个器官中均有表达,在叶片中的表达量最高,是根中表达量的5.26倍。GPS基因的相对表达量与皂苷量呈现出同升同降的变化趋势,表现为显著正相关关系(r=0.851,P<0.05)。结论 首次克隆获得刺五加GPS基因的cDNA全长序列,明确了刺五加GPS基因的表达量与皂苷含量之间存在正相关关系 %K 刺五加 香叶基焦磷酸合成酶 克隆 实时荧光定量PCR 皂苷 %U http://www.tiprpress.com/zcy/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20190529&flag=1