%0 Journal Article %T 深海太平洋火色杆菌琼胶降解基因分析和琼胶酶Aga0950的表达及酶学性质 %A 产竹华 %A 侯艳平 %A 曾润颖 %A 杨素萍 %A 狄文婕 %A 赵春贵 %J - %D 2018 %R 10.13343/j.cnki.wsxb.20170191 %X [目的]对深海太平洋火色杆菌(Flammeovirga pacifica WPAGA1)全基因组进行生物信息学分析,筛选获得琼胶酶基因aga0950,采用基因工程手段对该基因的功能和性质进行验证和分析。[方法]采用Illumina HiSeq2500测序技术进行基因组测序分析;采用克隆表达和镍柱纯化方法获得纯aga0950基因表达产物;采用薄层层析(TLC)和离子色谱(IC)法分析酶降解琼胶产物;采用二硝基水杨酸法(DNS)测定琼胶酶活性。[结果]基因组序列分析表明,菌株WPAGA1全基因组拥有13个β-琼胶酶相关基因;氨基酸序列比对显示,同源性为60%–85%,其中aga0950是具有GH16家族典型特征的基因,同源性为67%。纯化的重组酶Aga0950比活力达51770 U/mg,具有高效降解琼胶活性,降解终产物为新琼四糖和新琼六糖;最适温度为50℃,最适pH为4.0–10.0;Co2+、Mn2+和Fe3+促进酶活,Cu2+抑制酶活。[结论]深海菌株WPAGA1具有丰富的琼胶酶基因;属于GH16家族的琼胶酶基因aga0950表达产物具有高效降解胶琼活性和良好的热、酸、碱稳定性 %K 琼胶酶 琼胶寡糖 基因组 太平洋火色杆菌 %U http://journals.im.ac.cn/ACTAMICROCN/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20180306&flag=1