%0 Journal Article
%T 毕赤酵母表达的嗜热蓝状菌β-葡萄糖苷酶N-糖基化修饰的作用与功能
%A 华晨
%A 姚斌
%A 李新新
%A 柏映国
%A 石鹏君
%A 罗会颖
%A 马锐
%J -
%D 2019
%R 10.13343/j.cnki.wsxb.20180042
%X [目的]研究N-糖基化对来源于嗜热蓝状菌β-葡萄糖苷酶（β-glucosidase，Bgl3A）的酶学性质影响。[方法]采用定点突变技术构建了3个去N-糖基化的突变体T44A、S228A、S299A，并分别在毕赤酵母GS115中表达纯化。[结果]与野生型Bgl3A相比，突变体S228A分泌蛋白产量极低，仅能微量检测到pNPG活性；突变体T44A和S299A的最适pH和最适温度没有改变，分别为4.0和75℃，但二者的Tm值和70℃下的热稳定性都明显优于野生型。以pNPG为底物时，突变体S299A和T44A的催化效率分别降低了14.5%和70.0%；以纤维二糖为底物时，T44A的催化效率基本不变，而S299A的催化效率提高了1.1倍。[结论]Bgl3A不同位点的N-糖基化修饰对酶的分泌和酶学性质的影响具有明显差异。其中，N226位的N-糖基化在维持酶的表达和功能方面至关重要，而去除N297位点的N-糖基化可以提高酶的热稳定性及对纤维二糖的催化效率
%K 嗜热蓝状菌 β-葡萄糖苷酶 N-糖基化 热稳定性 催化效率
%U http://journals.im.ac.cn/ACTAMICROCN/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20190104&flag=1