%0 Journal Article
%T 改造大肠杆菌卟啉代谢途径对重组过氧化物酶活性的影响
%A 丁涛
%A 白林含
%A 黄莘
%A 黄非
%J -
%D 2018
%R 10.13343/j.cnki.wsxb.20170544
%X [目的]原核表达某些需辅因子的外源蛋白时往往酶活偏低，为提高酶活和减少外加辅因子的成本，我们尝试在大肠杆菌中表达外源过氧化氢-过氧化物酶的同时提高大肠杆菌中与该酶辅因子相关的合成代谢。[方法]本研究克隆了中度嗜盐菌Halomonas elongata DSM2581的过氧化氢-过氧化物酶CAT-POD（catalase-peroxidase）编码基因katG的ORF，构建原核表达载体pET28a-katG，实现了CAT-POD在大肠杆菌中的重组表达。由于CAT-POD活性依赖其活性中心血红素，而血卟啉是血红素的骨架，通过构建原核表达载体pUC19-tac-hemA，将编码5-氨基乙酰丙酸合成酶的hemA基因在大肠杆菌中过量表达，提高卟啉的含量，从而提高重组蛋白CAT-POD的酶活。[结果]最终的CAT酶活达到了377 U/mL，为对照组的7.5倍。[结论]本研究为工业生产高活性CAT-POD提供了有效的方案，也为体外重组表达含辅因子的蛋白提供可借鉴的思路
%K 中度嗜盐菌 过氧化物酶CAT-POD 原核表达 卟啉代谢
%U http://journals.im.ac.cn/ACTAMICROCN/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20180910&flag=1