%0 Journal Article
%T 非核糖体多肽Surugamides生物合成基因簇镶嵌式结构的解析
%A 周永军
%A 徐石海
%A 李蕾
%A 杨帆
%A 林厚文
%A 林霄
%A 王淑萍
%A 许春敏
%A 邓海
%J -
%D 2019
%R 10.13343/j.cnki.wsxb.20180038
%X [目的]多肽化合物Surugamides（sgm）生物合成基因簇包含4个非核糖体多肽合酶（NRPS）基因surA-D，负责2个NRPS生物合成途径。已有报道确认surA基因与Surugamide A产物相关，而surB基因与sgm F产物相关，但对surC和surD基因功能的归属尚没有实验证据。本工作拟在之前研究的基础上进一步确认surA和surD负责Surugamide A产物生物合成，为基因工程改造Surugamides生物合成途径以及研究其NRPS蛋白之间的识别机制提供理论依据。[方法]从海绵中分离放线菌并通过16S rRNA基因序列比对分析其分类单元。通过在线数据库antiSMASH分析基因组序列，发现天然产物生物合成基因簇。通过UPLC-Q-TOF-MS和13C NMR鉴定化合物结构。把构建完成的同源重组双交换质粒导入链霉菌宿主后筛选基因缺失或替换突变株。[结果]从胄甲海绵来源链霉菌S.albidoflavus LHW3101基因组中发现了Surugamides生物合成基因簇，确认了该菌株发酵产物中的化合物sgm A和sgm F。构建了surB和surC基因同时缺失的突变株RJ9，发现RJ9不再产sgm F而仍然产Surugamide A。在缺失突变surB和surC基因的同时在surD基因前引入了组成型强启动子ermEp*，结果发现RJ9产Surugamide A水平是野生型菌株的约2倍。[结论]确认了surB和surC基因与sgm A产物无关。在surD基因前引入强启动子后显著提高了Surugamide A的产量，提示surD基因与sgm A产物相关，结合已报到surA基因与Surugamide A产物相关的证据，进一步确认了surA和surD基因负责Surugamide A生物合成的推论
%K 微生物天然产物 非核糖体多肽合酶 生物合成基因簇
%U http://journals.im.ac.cn/ACTAMICROCN/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20190103&flag=1