%0 Journal Article %T 产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备与再生条件 %J 应用与环境生物学报 %D 2018 %R 10.19675/j.cnki.1006-687x.2017.05040 %X 原生质体融合技术是一种重要的微生物育种方法. 以能产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌ZGL14为出发菌株,探讨影响其原生质体制备和再生的主要因素. 通过研究菌龄、溶菌酶浓度、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂的pH值、再生培养基类型和培养方式等对枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备与再生的影响,确定其最优化条件. 结果显示:枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备的最优条件为菌龄9 h,溶菌酶浓度0.2 mg/mL,酶解时间10 min,酶解温度32 ℃,渗透压稳定剂的pH值 7.0. 在此条件下,枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体的形成率为98%,再生率达30%. 枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体再生培养基以琥珀酸钠作为渗透压稳定剂并结合Ca2+再生效果较好,再生方式以单层培养较好. 本研究获得了枯草芽孢杆菌ZGL14原生质体制备和再生的最佳条件,可为实现其融合育种提供技术支持. (图7 表1 参14 %K 枯草芽孢杆菌 %K 原生质体制备 %K 原生质体再生 %K 形成率 %K 再生率 %K 渗透压稳定剂 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=2017.0504