%0 Journal Article
%T Gata4基因H435Y突变型小鼠模型的建立及验证
%J 南方医科大学学报
%D 2018
%X 目的选择野生型C57BL/6J 小鼠为研究模型，利用CRISPR/Cas9 技术建立Gata4 基因H435Y突变型小鼠。方法针对 Gata4基因的基因序列信息设计针对Gata4基因H435Y位点的单链向导RNA（single-guideRNA，sgRNA），经活性检测后，将具 有活性的sgRNA和Cas9体外转录成RNA，通过显微注射将sgRNA、Cas9 mRNA以及含有点突变序列的donor DNA片段注射 到小鼠受精卵中，通过PCR和基因测序方法对Gata4基因突变进行检测及鉴定，培育Gata4基因突变小鼠并分析后代的突变情 况。结果顺利构建sgRNA载体并体外转录，成功sgRNA、Cas9 mRNA以及含有点突变序列的donor DNA片段注射到受精卵 中。基因测序鉴定获得4只F0代初建鼠。选取阳性F0代小鼠与野生型C57BL/6J小鼠杂交，得到F1代鼠，再相互交配获得F2 代鼠。PCR显示F2代鼠Gata4基因H435Y突变，成功建立Gata4基因H435Y突变小鼠模型并传代繁育。结论通过CRISPR/ Cas9技术可以成功建立Gata4基因H435Y突变小鼠动物模型
%K Gata4
%K CRISPR/Cas9
%K sgRNA
%K 动物模型
%K 先天性心脏病
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=2018101245