%0 Journal Article %T 美洲拟鲽抗菌肽Pleurocidin在大肠杆菌中的高效分泌表达及优化 %A 吴思群 %A 姚斌 %A 徐雪姣 %A 杨培龙 %A 查向东 %A 车媛媛 %A 马利娟 %A 黄火清 %J 生物工程学报 %D 2016 %R 10.13345/j.cjb.150286 %X 为在大肠杆菌中分泌表达Pleurocidin,并提高融合蛋白的分泌效率,将Pleurocidin基因和Cherry DNA序列通过平末端连接融合,再将融合基因整合到pET22b (+) 载体中,转化大肠杆菌BL21 (DE3);乳糖诱导表达。成功构建含pET22b (+)-CP重组质粒的基因工程菌,用乳糖诱导获得高效表达。在诱导16 h时加入甘氨酸可以显著提高融合蛋白Cherry-Pleurocidin的分泌效率。用稀盐酸水解融合蛋白的酸敏感位点,再进一步分离纯化即得到r-Pleurocidin,其对大肠杆菌DH5α和枯草芽孢杆菌BS168具有明显的抑菌活性。结果表明成功构建了高效表达Pleurocidin的大肠杆菌基因工程菌,获得有活性的r-Pleurocidin %K Pleurocidin %K 分泌表达 %K Asp-Pro酸敏感位点 %K 抑菌活性 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc16030365&flag=1