%0 Journal Article %T 黄翅大白蚁来源β-葡萄糖苷酶的分子改造 %A 倪金凤 %A 姜淑喆 %A 曹春静 %A 李净净 %A 申玉龙 %J 生物工程学报 %D 2018 %R 10.13345/j.cjb.170511 %X 纤维素水解成为葡萄糖需要一系列纤维素酶的作用,其中β-葡萄糖苷酶 (β-glucosidases) 起着至关重要的作用。来自于培菌白蚁中肠的β-葡萄糖苷酶 (MbmgBG1) 具有较高的葡萄糖耐受性 (1.5 mol/L的葡萄糖,保持60%以上的酶活力),但是,酶活力低和热稳定性差限制了β-葡萄糖苷酶 (MbmgBG1) 在食品以及工业领域中的应用。因此通过对保守氨基酸附近的非保守氨基酸定点突变,获得点突变体 (F167L、T176C、E347I、R354K、N393G和V425M),其中突变体F167L、R354K的比活力 (底物pNPG) 比MbmgBG1分别高出约2倍和4倍。突变体的Kcat/Km值比野生型大,反映了突变体对底物的亲和力以及催化能力比MbmgBG1强。当酶活力保留60%以上时,MbmgBG1所耐受的葡萄糖浓度为1.5 mol/L,而F167L为2.0 mol/L,R354K为3.0 mol/L。这些特性的增强表明,对活性中心附近保守区域内的非保守氨基酸突变,可以较大程度地影响活性,因此需要更深入地研究β-葡萄糖苷酶的活性中心位点,进行改造以提高催化效率 %K β-葡萄糖苷酶 %K 点突变 %K 动力学常数 %K 葡萄糖耐受性 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc18071081&flag=1