%0 Journal Article %T 毕赤酵母中tRNAPro CCG基因的表达及其作用效果 %A 宋诙 %A 彭梦 %A 曾艳 %A 谭明 %A 郑宏臣 %J 生物工程学报 %D 2019 %R 10.13345/j.cjb.180126 %X 转运核糖核酸 (tRNA) 是蛋白质合成过程中重要参与成分之一,为了探索稀有密码子对应的tRNA (稀少tRNA) 丰度改变对外源基因表达量的影响,文中构建了毕赤酵母稀少tRNA基因与外源基因共表达体系。首先在GFP基因中添加由4个连续脯氨酸稀有密码子CCG组成的阻遏区,结果显示该GFP基因的表达量明显降低。然后将带有阻遏区的GFP基因和tRNAPro CCG基因顺次连接于pPIC9K载体上,在毕赤酵母GS115中共表达,结果使GFP表达量提高了4.9%;另将带有阻遏区的GFP基因和tRNAPro CCG基因分别连接于pPIC9K和pFLDα载体,在毕赤酵母GS115中共表达,GFP表达量最高提高了12.5%;应用同样方式将tRNAPro CCG基因与NFATc3T-GFP融合基因共表达,其表达量提高了21.3%。可见,tRNAPro CCG在毕赤酵母GS115中确为稀少tRNA,通过共表达tRNAPro CCG基因可显著提高带有连续该密码子的外源基因表达量,并且,文中构建的共表达体系将同样适用于其他稀少tRNA基因的筛选和验证 %K 毕赤酵母 %K 稀少tRNA丰度 %K tRNAPro CCG基因 %K 共表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc19010070&flag=1