%0 Journal Article
%T 绵羊体细胞核移植去核前程序的优化
%A 周平
%A 唐红
%A 张译元
%A 李迎利
%A 王立民
%A 郭延华
%J 生物工程学报
%D 2017
%R 10.13345/j.cjb.160308
%X 目前绵羊体细胞克隆效率仍然很低，本研究拟对去核前的操作环节进行优化。主要为卵巢保存时间 (3 h和3–5 h)、卵母细胞体外成熟时间 (18 h和24 h)、供核细胞贴壁率 (10%和30%) 和盲吸法去核时间 (16 hpm和18 hpm) 等4个方面优化。以成熟率、融合率和重构胚胎发育能力作为评价参数。结果表明：在卵巢保存方面，卵巢保存3 h组卵母细胞成熟率显著高于3–5 h组卵母细胞成熟率 (60.18% vs 52.50%) (P<0.05)，重构胚胎发育力差异不显著 (P>0.05)；在体外成熟时间方面，体外成熟18 h组和24 h组卵母细胞成熟率差异极显著 (53.81% vs 89.06%) (P<0.01)，胚胎发育力差异不显著 (P>0.05)；在融合率方面，贴壁率30%组极显著高于贴壁率10%组 (80.85% vs 57.69%) (P<0.01)，在克隆胚胎发育率方面没有显著差异 (P>0.05)，具有贴比率差异性的细胞在细胞生长平台期表现出差异性；在去核时间方面，16 hpm组和18 hpm组胚胎卵裂率差异显著，囊胚发育力差异不显著 (P>0.05)，16 hpm组获得一只克隆羊，重复16 hpm获得4只妊娠克隆羊。组织微卫星序列经SDS-PAGE分析，DNA指纹与供体细胞相同。结论：去核前程序的优化保证了材料的质量，为提高克隆胚胎数量和质量奠定基础，可以获得体细胞克隆羊
%K 核移植
%K 卵巢保存时间
%K 贴壁率
%K 去核时间
%K 克隆羊
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc17050730&flag=1