%0 Journal Article
%T α-氨基酸酯酰基转移酶表达纯化、酶学性质及其催化应用
%A 侯学文
%A 刘鹏飞
%A 张洪斌
%A 胡雪芹
%A 陆启蒙
%J 生物工程学报
%D 2018
%R 10.13345/j.cjb.180017
%X α-氨基酸酯酰基转移酶 (α-amino acid ester acyltransferase，AET) 能够催化底物L-丙氨酸甲酯盐酸盐、L-谷氨酰胺合成L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 (L-alanyl-L-glutamine，丙谷二肽)。利用重组大肠杆菌saet-QC01表达α-氨基酸酯酰基转移酶，对其表达条件进行了优化，通过Ni-NTA亲和层析法分离纯化重组蛋白，并对其酶学性质、催化应用进行了研究。适合酶表达的诱导条件：温度20 ℃，诱导阶段 (OD600=2.0?2.5)，IPTG浓度0.6 mmol/L，诱导时间12 h。α-氨基酸酯酰基转移酶的最适反应温度27 ℃，最适pH 8.5，在pH 7.0?8.0很稳定，在酸性条件下相对稳定，低浓度的Co2+、低浓度的EDTA对酶活有促进作用。在底物浓度丙氨酸甲酯盐酸盐600 mmol/L、谷氨酰胺480 mmol/L，丙谷二肽的产量达到78.2 g/L，生产速率达到1.955 g/(L·min)，转化率达到75.0%。α-氨基酸酯酰基转移酶具有良好的酸碱耐受性，催化效率高的优良特性，在工业生产中具有较好的应用潜力
%K α-氨基酸酯酰基转移酶
%K 丙谷二肽
%K 表达条件
%K 酶学性质
%K 催化条件
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc18071169&flag=1