%0 Journal Article %T 枯草芽孢杆菌SCK6超级感受态的制备和转化条件优化 %A 卢争辉 %A 周玉玲 %A 张桂敏 %A 李世宇 %A 李信志 %J 生物工程学报 %D 2017 %R 10.13345/j.cjb.160362 %X 枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性好氧细菌,因其安全性和高分泌特性,已被广泛用作异源蛋白的表达宿主。然而,相比大肠杆菌,枯草芽孢杆菌的转化效率低,限制了其作为宿主的异源蛋白的定向进化。本文通过改变培养基、诱导剂浓度、质粒类型等参数优化感受态制备的条件,利用常规质粒进行转化,结果表明,用营养丰富的YN培养基替代常规LB培养基制备感受态,可以使转化效率提高4倍左右;加入1.5%的木糖诱导2 h,感受态的转化效率又提高2倍左右;用大肠杆菌Escherichia coli GM272来源的质粒又可进一步提高转化效率3倍左右。综合最优条件制备SCK6的感受态,转化整合型质粒pDG1730,效率可以达到106 CFU/μg,相对未优化的条件提高了2个数量级,为基于枯草芽孢杆菌的酶的定向进化和代谢工程奠定了基础 %K 枯草芽孢杆菌 %K ComK基因 %K 木糖 %K 感受态 %K pDG1730 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc17040692&flag=1