%0 Journal Article
%T 复合透明质酸钠的硫酸钙可注射材料促进骨再生的实验研究
%A 吴志宏
%A 尹博
%A 李强
%A 李波
%A 许德荣
%A 邱贵兴
%A 马培
%A 黄振飞
%J -
%D 2017
%R doi:10.7507/1002-1892.201612145
%X 目的制备复合透明质酸钠的硫酸钙可注射材料，观察其促进骨再生作用，为骨缺损修复提供一种可注射材料。 方法将硫酸钙分别与透明质酸钠溶液、交联透明质酸钠溶液、PBS 溶液，按照 2∶1（W/V）比例混合，制备 3 种复合材料（记作 CA+HA、CA+HAC 以及 CA）。通过将 3 种复合材料浸泡于 PBS 溶液中观察其形变并进行 X 线衍射分析，观察材料稳定性。参照 ISO10993-5 制备 3 种复合材料浸提液，用于培养小鼠前成骨细胞（MC3T3-E1），并采用细胞增殖-毒性检测试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）方法检测材料的生物相容性和不同浓度浸提液促进细胞增殖的能力，以单纯培养基培养细胞作为对照组。采用成骨分化培养基制作促进细胞增殖的最佳浓度浸提液，用于培养 MC3T3-E1 细胞，ELISA 法检测成骨分化相关蛋白 ALP、Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ，COL-Ⅰ）及骨钙蛋白（osteocalcin，OCN）浓度。取新西兰大白兔制作股骨髁骨缺损模型，分别植入 CA+HA、CA+HAC 以及 CA 材料，于 6、12 周取标本行 Micro-CT 扫描并计算骨组织占组织体积百分比（bone volume/tissue volume，BV/TV），然后标本切片行HE染色，观察缺损区新骨形成情况。 结果复合材料稳定性检测示，CA+HA 及 CA+HAC 具有良好可注射性，在 PBS 溶液中不易溃散，优于 CA。生物相容性实验显示，培养 6、12、24 h，CA 组吸光度（A）值均低于对照组（P<0.05）；CA+HA 组、CA+HAC 组A 值与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。细胞增殖实验显示，25%、50% 浓度浸提液培养 5 d 时 CA 组、CA+HA 组和 CA+HAC 组A 值均显著高于对照组（P<0.05）；75%、100% 浓度浸提液培养后，仅 CA+HA 组A 值高于对照组（P<0.05）。选择 50% 浓度浸提液进行成骨分化实验。ELISA 检测示，培养 14、21 d 时 CA+HA 组和 CA+HAC 组 ALP、COL-Ⅰ、OCN 浓度均显著高于对照组、CA 组（P<0.05）。Micro-CT 检查示，6、12 周时 CA+HA 组、CA+HAC 组间 BV/TV 差异无统计学意义（P>0.05），但均显著高于 CA 组（P<0.05）；HE 染色示，6 周时 CA 组缺损处无成形骨组织，CA+HA 组和 CA+HAC 组可见少量骨组织；12 周时，CA 组可见到少量细条索状骨组织形成，CA+HA 组和 CA+HAC 组均见较多条索状骨组织，明显优于 CA 组，但两组间无显著差异。 结论硫酸钙与透明质酸钠溶液及其交联产品按照 2∶1（W/V）比例混合制备的复合材料具有稳定性和可注射性，体外能促进小鼠 MC3T3-E1 细胞增殖和分化，植入新西兰大白兔体内后具有良好成骨能力，有望作为一种可注射材料用于骨缺损微创治疗
%K 骨替代材料
%K 可注射性
%K 透明质酸钠
%K 交联
%K 硫酸钙
%U http://www.rrsurg.com:80/article/10.7507/1002-1892.201612145