%0 Journal Article
%T 长时间不同强度负压对兔 BMSCs 成骨分化及增殖的影响研究
%A 吴向未
%A 张宏伟
%A 彭心宇
%A 徐强
%A 李伯龙
%A 葛权虎
%J -
%D 2017
%R doi:10.7507/1002-1892.201701095
%X 目的 探讨长时间不同强度负压对兔 BMSCs 成骨分化及增殖的影响。 方法 取 4～6 月龄新西兰大白兔股骨骨髓，采用密度梯度离心法分离培养 BMSCs，并行流式细胞术及成骨诱导鉴定。取第 3 代细胞采用成骨诱导培养基诱导培养，并加载不同强度负压，分别为 0、75、150 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）（对照组、低负压组、高负压组）；负压时间为 30 min/h。倒置显微镜下观察细胞生长状态，绘制细胞生长曲线；诱导 3、7、14 d 采用 ELISA 法检测细胞 ALP 活性，14 d 采用实时荧光定量 PCR 及 Western blot 检测各组Ⅰ型胶原、骨钙素（osteocalcin，OC）基因及蛋白表达。 结果 经流式细胞仪及成骨诱导鉴定所培养细胞为 BMSCs；第 3 代 BMSCs 为典型的长梭形和不规则形。诱导 4 d，高负压组细胞显著少于对照组及低负压组（P<0.05），低负压组与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；5～7 d 3 组间细胞数比较差异均有统计学意义（P<0.05），负压越大细胞增殖受抑制越明显。ALP 活性检测示，诱导 3 d 各组间比较差异无统计学意义（P>0.05）；7 d，仅高负压组与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；14 d，3 组间比较差异均有统计学意义（P<0.05），负压越大 ALP 活性越高。实时荧光定量 PCR 及 Western blot 检测示，低负压组及高负压组Ⅰ型胶原和 OC mRNA 及蛋白表达量均显著高于对照组，高负压组高于低负压组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 随负压增高，兔 BMSCs 成骨能力逐渐增强，而细胞增殖能力逐渐受抑制
%K BMSCs
%K 负压
%K 成骨分化
%K 细胞增殖
%K 兔
%U http://www.rrsurg.com:80/article/10.7507/1002-1892.201701095