%0 Journal Article
%T 脂肪间充质干细胞-壳聚糖凝胶复合物治疗大鼠深Ⅱ度烫伤创面实验研究
%A 代蕾
%A 罗兴前
%A 郭杏
%A 黄海峻
%J -
%D 2019
%R doi:10.7507/1002-1892.201804109
%X 目的制备脂肪间充质干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）与温敏氯化壳聚糖（chitosan chloride，CSCl）凝胶复合物，研究其生物相容性及对大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复的可行性。 方法取 SPF 级 6 周龄雄性 SD 大鼠皮下脂肪组织，采用酶原消化并差速贴壁法制备 ADSCs。将 CSCl、β-甘油磷酸钠和羟乙基纤维素按 8∶2∶2.5 比例混合，制作温敏 CSCl 凝胶；采用 Live/Dead 染色和细胞计数试剂盒 8（cell counting kit 8，CCK-8）法观察 ADSCs 在其中的存活和增殖情况。取 SPF 级 8 周龄雄性 SD 大鼠 72 只，采用开水接触烫伤法制备深Ⅱ度烫伤创面模型，随机分为 3 组，每组 24 只，A 组为空白对照组，B 组用温敏 CSCl 凝胶涂抹创面，C 组用 ADSCs/温敏 CSCl 凝胶复合物涂抹创面。术后 3、7、14、21 d 观察创面闭合情况并计算创面闭合率；术后 7 d 行 HE 染色观察炎性细胞数，21 d 行 HE 染色观察新生表皮厚度；同时于术后 7 d 行 CD31 免疫组织化学染色观察新生微血管情况。 结果CSCl 有温度敏感性，4℃ 为液态，37℃ 时成凝胶。Live/Dead 染色和 CCK-8 法结果显示 ADSCs 在温敏 CSCl 凝胶中存活并持续增殖。大体观察示，术后各时间点 C 组创面闭合率均高于 A、B 组（P<0.05）。HE 染色示，术后 7 d，3 组大鼠创面修复进入纤维增生期，各组可见胶原沉积，真皮层可见炎性细胞浸润，C 组炎性细胞数显著小于 A、B 组，B 组小于 A 组（P<0.01）。术后 21 d，B、C 组新生上皮及真皮层纤维结缔组织排列整齐，可见成纤维细胞及新生毛细血管；A 组亦可见新生表皮覆盖，但真皮层纤维结缔组织排列较紊乱，见零星毛细血管。C 组新生表皮厚度显著大于 A、B 组，B 组大于 A 组（P<0.01）。术后 7 d，CD31 免疫组织化学染色示各组均可见新生微血管，C 组大鼠创面新生微血管数显著高于 A、B 组，B 组高于 A 组（P<0.05）。 结论ADSCs/温敏 CSCl 凝胶复合物具有良好的组织相容性，并且能加快大鼠深Ⅱ度烫伤创面修复
%K 氯化壳聚糖
%K 凝胶
%K 脂肪间充质干细胞
%K 深Ⅱ度烫伤
%K 创面修复
%K 大鼠
%U http://www.rrsurg.com:80/article/10.7507/1002-1892.201804109