%0 Journal Article
%T 小鼠PNPLA7敲降重组腺病毒的构建及其生物学功能的初步研究
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%D 2018
%R 10.7655/NYDXBNS20180203
%X 目的：构建小鼠PNPLA7基因的敲降重组腺病毒，检测PNPLA7敲降重组腺病毒对小鼠肝脏PNPLA7蛋白的敲降效率及对肝脏甘油三酯含量的影响。方法：将对照siNC以及敲降PNPLA7的siRNA设计为shRNA并插入到pshuttle-CMV-silence穿梭质粒中，挑选克隆并测序鉴定，测序成功后将质粒进行PmeⅠ线性化，转入含有腺病毒骨架pAdeasy的BJ5183感受态细胞中进行同源重组，重组成功后的质粒经PacⅠ线性化转染293A细胞进行腺病毒包装，得到Ad-shNC对照腺病毒以及Ad-shPNPLA7敲降腺病毒。通过尾静脉注射腺病毒7 d后根据免疫印迹实验检测小鼠肝脏中PNPLA7敲降效率，同时利用Folch提脂方法提取并检测小鼠肝脏中甘油三酯含量。结果：成功获得对照腺病毒Ad-shNC以及敲降腺病毒Ad-shPNPLA7。通过尾静脉注射进行小鼠肝脏PNPLA7敲降，结果显示Ad-shPNPLA7腺病毒可成功降低PNPLA7的蛋白表达，敲降PNPLA7后引起肝脏甘油三酯含量上调。结论：小鼠PNPLA7的敲降腺病毒构建成功，敲降PNPLA7引起肝脏中甘油三酯含量升高。
%U http://jnmu.njmu.edu.cn/zr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=aumn180203&flag=1