%0 Journal Article %T 重组牛乳铁蛋白功能片段在毕赤酵母中的表达及高密度发酵 %A 任郑 %A 吴涛 %A 孙杰 %A 汪钊 %A 钱晓芬 %A 魏春 %J - %D 2019 %R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019993 %X 摘要 该研究合成了密码子优化后的牛乳铁蛋白功能片段(bovine lactoferrin functional fragment, BlfFf),转入毕赤酵母GS115中重组表达并筛选抗性菌株,通过镍亲和层析纯化BlfFf,以Western Blot、液质联用和ELISA对重组蛋白进行鉴定及检测。比较了5 L发酵罐生产中3种不同高密度发酵培养基对BlfFf生产的影响。结果表明:重组转化子正确表达了BlfFf。镍亲和层析中,150 mmol/L咪唑洗脱可得到电泳纯37 kDa的目标条带。在3种高密度发酵培养基中,RDM最优,诱导48 h,菌体湿细胞密度达到297 g/L,BlfFf表达量为38.1 mg/L %K 牛乳铁蛋白 %K 毕赤酵母 %K 高密度发酵 %K 分泌表达 %K 纯化 %K 鉴定 %U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019993