%0 Journal Article %T 高密度发酵产酪氨酸酚裂解酶及催化合成L-DOPA %A 周景文 %A 徐冰冰 %A 曾伟主 %A 未雅楠 %A 雷庆子 %A 黄科峰 %J - %D 2019 %R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019724 %X 摘要 为了提高酪氨酸酚裂解酶(tyrosine phenol-lyase,TPL) 的表达量和酶活,使之更高效地催化合成左旋多巴(3,4-2-dihydroxylphenylalanine,L-DOPA),在摇瓶优化的基础上,研究了溶氧控制策略、补料策略、诱导温度和诱导策略对菌体生长、TPL酶活和L-DOPA产量的影响。结果表明,在5 L发酵罐中25 ℃诱导条件下,采用DO-stat补料策略控制罐内溶氧的体积分数为20%,菌体浓度、TPL酶活和催化合成L-DOPA产量较分批培养分别提高了17.9%、57.7%和27.8%。诱导后控制溶氧体积分数在40%相比于20%更利于TPL的表达,酶活相比于20%的DO的提高了33.8%。通过优化起始诱导时间,在菌体生长的对数前期(OD600=7)诱导,细胞浓度提高到51.2 g/L,酶活提高到2.43 U/mL,L-DOPA产量为56.58 g/L,较分批培养分别提高了64.1%、170%和209.2%。初步实现了重组大肠杆菌高密度培养生产TPL,为L-DOPA产业化研究奠定了基础 %K 酪氨酸酚裂解酶 %K L-DOPA %K 溶氧 %K DO-start %K 诱导策略 %U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019724