%0 Journal Article
%T 多点突变提高α-L-鼠李糖苷酶热稳定性
%A 刘嘉男
%A 吴喆瑜
%A 巩建业
%A 廖辉
%A 李利君
%A 李文静
%A 杨岩
%A 刘小琴
%J -
%D 2019
%R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018703
%X 摘要 为了提高α-L-鼠李糖苷酶的热稳定性,对实验室前期构建的K406R、K440R、K573V、E631F四个不同氨基酸位点的单点突变体进行联合突变,得到了K406R-K573V、K406R-E631F、K440R-K573V、K440R-E631F四个联合突变体。结果表明,相比于野生型(wild type, WT),联合突变体K440R-K573V和K440R-E631F的热稳定性有所提高,在60 ℃时半衰期分别提高了1.13倍,1.44倍;在65 ℃的半衰期分别提高了1.64倍,1.64倍;在70 ℃ 的半衰期分别提高了1.88倍,1.68倍。对突变体K440R-E631F进行圆二色谱分析、分子动力学以及分析微观结构变化分析可知,K440R-E631F突变体与WT相比,内部疏水性有所提高,二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲含量增多,可能与热稳定性的提高相关
%K α-<i> L</i> -鼠李糖苷酶
%K 联合突变
%K 热稳定性
%U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018703