%0 Journal Article
%T 不动杆菌来源L-天冬氨酸-β-脱羧酶的表达与酶学性质分析
%A 刘中美
%A 周丽
%A 周哲敏
%A 赵庭
%A 于佳印
%J -
%D 2020
%R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023070
%X 摘要 L-天冬氨酸-β-脱羧酶(L-aspartate-β-decarboxylase, Asd)催化L-天冬氨酸脱羧生成L-丙氨酸,该研究对Acinetobacter radioresistens来源的Asd酶进行酶学性质解析,为工业生产L-丙氨酸提供参考。构建表达质粒pET28a-ArAsd,转化大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)实现ArAsd基因的异源表达。利用亲和层析纯化获得携带His标签的纯酶后进行酶学性质研究,并考察重组菌底物、产物耐受的能力。结果表明,重组酶比酶活力为753 U/mg,其最适催化温度为55 ℃,最适反应pH为4.5,在40~45 ℃、pH 6.0~7.0条件下较稳定,45 ℃处理3 h酶活力剩余70%左右,pH 7.0处理12 h酶活力剩余90%左右。产物L-丙氨酸浓度超过500 mmol/L时重组菌细胞酶活力有明显降低,底物L-天冬氨酸对重组菌细胞催化活性有促进作用。该研究首次在E.coli中异源表达Acinetobacter radioresistens来源Asd酶,其比酶活力高于目前已有报道的Asd酶,具有一定的工业应用潜力
%K <i>L-</i>天冬氨酸-β-脱羧酶
%K 酶学性质解析
%K 不动杆菌
%K <i>L-</i>丙氨酸
%U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023070