%0 Journal Article
%T 亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶共表达菌株发酵产酶条件优化及其在L-2-氨基丁酸合成中的应用
%A 张博
%A 柳志强
%A 陈策
%A 徐建妙
%J -
%D 2019
%R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019942
%X 摘要 亮氨酸脱氢酶催化2-酮丁酸生成L-2-氨基丁酸需要辅酶NADH参与,构建Escherichia coli (LeuDH/FDH),通过共表达亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶实现了辅酶NADH胞内循环再生。通过产酶条件优化,提高该菌株催化制备L-2-氨基丁酸的效率。结果表明,在5 L发酵罐上,在诱导温度为22 ℃、诱导剂乳糖质量浓度为8.0 g/L和诱导时间为17 h的条件下,亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的酶活分别达到79.2 U/g和216.1 U/g,催化效果最佳。利用该菌株全细胞为催化剂,耦合苏氨酸脱氨酶,在1 L反应体系中进行了催化反应,L-苏氨酸质量浓度为180 g/L时,无需额外添加辅酶, 8 h反应后底物转化率达到99%,L-2-氨基丁酸e.e.值99.5%以上,时空产率19.3 g/(L·h)。该研究为建立高效、低成本的L-2-氨基丁酸工业化生产方法提供了基础
%K <i>L</i>-2-氨基丁酸
%K 亮氨酸脱氢酶
%K 甲酸脱氢酶
%K 共表达
%K 优化
%U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019942