%0 Journal Article %T α-L- 阿拉伯呋喃糖苷酶在毕赤酵母中的表达及其对大麦麦芽 过滤性能的影响 %J - %D 2018 %R 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015687 %X 摘要 通过PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger)基因组扩增获得一个全长1790 bp的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因,基因含有一个50 bp的内含子序列,其对应的蛋白质序列含有5个O糖基化位点和9个N糖基化位点,N端含有18个氨基酸的信号肽序列。将目的基因与表达载体pPICZαA连接并在毕赤酵母X-33诱导表达,获得重组α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶。重组酶的相对分子质量为70 kDa,最适反应pH和温度分别为5.5和50 ℃;金属离子 Cu2+、Zn2+和Fe2+对重组酶的酶活有抑制作用,Fe3+对重组酶的酶活有促进作用;以4-Nitrophenyl α-L-arabinofuranoside为底物测得酶的Km值和Vmax值分别为0.78 mM和2.57 μmol/min/mg。在大麦麦芽协定糖化的初始阶段添加31.2 mU/g重组酶,麦汁的过滤速度提高了12.8%。以大麦麦芽阿拉伯木聚糖为底物,α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶与木聚糖酶有较好的协同作用 %K α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶 %K 克隆表达 %K 麦芽 %K 过滤性能 %K 协同作用 %U http://sf1970.cnif.cn/CN/10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015687