%0 Journal Article %T 丙型肝炎病毒核心蛋白稳定表达肝癌细胞株的构建及生物学研究 %A 刘娇 %A 单晓亮 %A 周帆 %A 唐霓 %A 权会琴 %A 陈庆美 %A 陈林林 %J - %D 2012 %X 摘要 旨在构建稳定表达HCV核心蛋白的稳定细胞系Huh7-Core并进行初步的生物学功能研究。利用PCR技术扩增HCV核心蛋白基因,通过酶切连接反应将目的基因克隆至载体pSEB-3Flag中,将重组质粒pSEB-3F-Core和辅助质粒pAmpho共转染Huh7细胞,经过Blasticidine抗性筛选,建立稳定表达HCV核心蛋白的肝癌细胞系Huh7-Core。采用RT-PCR、Western blot鉴定Huh7-Core细胞株中核心蛋白的稳定表达并采用MTS、结晶紫试验观察Huh7-Core稳定细胞株的增殖情况。结果显示,成功构建了表达HCV核心蛋白的稳定细胞株Huh7-Core。结晶紫、MTS试验证实Huh7-Core细胞较Huh7-3Flag细胞增殖速度增快,表达HCV核心蛋白的Huh7-Core稳定细胞株构建成功,Core稳定表达后可促进Huh7细胞生长速度 %K 丙型肝炎病毒 %K 核心蛋白 %K 生物学功能 %K 稳定细胞株 %K 细胞增殖 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6308.shtml