%0 Journal Article
%T 两个大豆MYB转录因子在原核细胞中的高效表达
%A 张庆林
%A 张海军
%A 李晓薇
%A 李景文
%A 王庆钰
%A 翟莹
%A 苏连泰
%A 赵旭
%J -
%D 2011
%X 摘要 大豆(Glycine max)GmMYB12a与GmMYB12B2基因属于典型的植物R2R3-MYB转录因子。为进一步研究两个MYB12转录因子与相应顺式作用元件的相互作用,构建了两基因的原核表达载体,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中实现高效表达。利用PCR技术,将两端带有特异酶切位点的GmMYB12a与GmMYB12B2全长基因亚克隆于原核表达载体pET-28a(+),酶切、测序鉴定确认获得两基因的重组原核表达载体pET-28a-GmMYB12a与pET-28a-GmMYB12B2。然后把重组载体转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达,提取细胞蛋白并采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况。结果表明,成功构建了两基因的原核表达载体,在IPTG浓度为1.2 mmol/L,诱导6 h后,目的蛋白能在Rosetta(DE3)中高效表达
%K 大豆
%K MYB转录因子
%K 载体构建
%K pET-28a(+)
%K Rosetta(DE3)
%K 原核表达
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract5873.shtml