%0 Journal Article
%T 重组人胰激肽原酶在大肠杆菌中的表达
%A 侯乐锋
%A 卢嘉宝
%A 陈劲春
%J -
%D 2011
%X 摘要 根据人胰激肽原酶的氨基酸序列,采用大肠杆菌偏爱密码子,设计合成目的基因片段约750 bp。将设计得到的片段连接到pET-22b(+)表达载体中并测序,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达。将IPTG诱导表达的菌体进行SDS-PAGE电泳,在相对分子质量24 kD处可明显观察到高表达带,主要以包涵体形式存在,质量分数可达21.6%,进一步测得蛋白活性为2.27 nmol/s。利用MALDI串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)鉴定蛋白,蛋白得分106,大于可信得分83(P<0.05),确定了蛋白一级结构的正确性
%K 大肠杆菌
%K 人胰激肽原酶
%K 表达
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6245.shtml