%0 Journal Article %T 指状青霉cyt b5和cyt b5r基因克隆及与cyp51A表达 %A 伍志刘德立 %A 牛玉慧 %A 王胜强 %A 耿辉 %A 秦婷婷 %J - %D 2016 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.09.024 %X 摘要 为探究指状青霉细胞色素b5(Cyt b5)与细胞色素b5还原酶(Cyt b5r)在细胞色素P450 CYP51A电子传递方面的功用,研究了指状青霉CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达机制;并检测了其对于cyp51A基因表达水平的影响。通过转录组分析筛选并PCR克隆获得了cyt b5与 cyt b5r基因,分别命名为HS-Pdcyt b5和HS-Pdcyt b5r。以多基因串联克隆载体pPICZαA为骨架构建了指状青霉共表达质粒ppbrA(pPIC-Pdcyp51A-cyt b5-cyt b5r);电转化法将重组质粒ppbrA导入毕赤酵母X-33中。qRT-PCR分析结果显示,CYP51A与Cyt b5-Cyt b5r共表达后,其基因表达水平升高54%-97%,并维持较长时间(48-72 h)。表明Cyt b5-Cyt b5r系统可将电子高效转移给CYP51A,从而增强cyp51A基因的转录表达。从指状青霉中克隆表达HS-PdCyt b5和HS-PdCyt b5r蛋白,并通过共表达的方式研究cyp51A基因的功能尚为首次报道 %K 指状青霉CYP51A %K 共表达 %K 细胞色素b5 %K 细胞色素b5还原酶 %K 毕赤酵母X-33 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract11265.shtml