%0 Journal Article
%T 优雅蝈螽卵巢Piwi 蛋白亚家族成员Giwi cDNA 序列全长的克隆与生物信息学分析
%A 刘静 周志军 常岩林
%J -
%D 2013
%X 摘要 旨在进一步研究piwi 基因在半变态昆虫干细胞自我更新和生殖系细胞发育中的作用。首先对实验室前期测定的优雅蝈螽（Gampsocleis gratiosa）转录组数据进行搜索，成功挑选出piwi 基因的同源体，命名为giwi。通过设计特异性引物，采用巢式RT-PCR 和RACE 末端扩增技术克隆获得该基因cDNA 序列。序列分析表明，优雅蝈螽giwi 基因cDNA 序列全长为3 462 bp，包含1 个完整的开放阅读框2 742 bp，编码913 个氨基酸，以及一个长度为111 bp 的5' 端非编码区和609 bp 的3' 端非编码区。预测的理论蛋白分子量为102.7 kD，等电点为9.55。Giwi 蛋白具备Piwi 蛋白亚家族全部特征，C 端的保守PIWI 结构域，中部的保守PAZ 结构域和N 端可变结构域。同源比对分析得到PIWI 结构域具有类似RNA 酶H 活性中心的DDH 三联催化模体，暗示该蛋白具有切割活性。系统发育分析指出昆虫的Piwi 和Aubergine 可能源于远古基因的重复事件。通过二代测序技术获得的转录组数据可以很好地服务于未来的功能基因研究
%K 优雅蝈螽
%K 生殖干细胞
%K Piwi
%K 转录组
%K cDNA
%K 3D
%K 结构
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract9737.shtml