%0 Journal Article
%T 米黑根毛霉脂肪酶基因的克隆、表达及活性分析
%A 刘姝娜
%A 吕鹏梅
%A 李惠文
%A 杨玲梅
%A 罗文
%A 蒋剑春
%A 袁振宏
%A 苗长林
%J -
%D 2013
%X 摘要 以米黑根毛霉(Rhizomucor miehei) 为出发菌株, 采用UNIQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒提取其总RNA, 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 扩增出米黑根毛霉脂肪酶(RML) 结构基因。构建真核重组表达质粒RML-pPIC9K, 电转化His+缺陷型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris) GS115, 利用MD-MM平板及PCR方法筛选和鉴定出重组子, 进行甲醇诱导表达。结果表明, RML基因能够在巴斯德毕赤酵母中实现高效表达。重组子发酵液经SDS-PAGE分析显示获得了与预期大小(约39 kD) 一致的蛋白表达特异条带, 用NaOH滴定法测其活性, 酶活可达84 U/mL
%K 米黑根毛霉
%K 脂肪酶
%K 毕赤酵母
%K 基因克隆
%K 基因表达
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract9878.shtml