%0 Journal Article %T 烟草HrBP的研究与应用 %A 于丹丹 %A 刘家驹 %A 宋宝安 %A 李向阳 %A 杨松 %A 毕亮 %A 王贞超 %A 胡德禹 %A 郭勤 %A 陈卓 %J - %D 2012 %X 摘要 旨在进一步发掘HrBP在新农药创制和抗病品种选育等方面的价值,采用BLAST和Clustal X2软件对HrBP进行序列同源性分析,发现其序列较保守;采用PSIPRED Protein Structure Prediction在线服务器进行烟草HrBP二级结构预测,采用UCLDepartment of Computer Science进行HrBP跨膜结构预测,发现两种可能存在的跨膜方式;采用SWISS-MODEL、Phyre和CPH进行HrBP空间结构预测,发现以膜蛋白为模板进行模建的蛋白具有相似的空间结构;建立基于Real-time PCR的HrBP mRNA定量分析方法,其相关系数为0.999 6;通过ProtScale方法分析HrBP抗原指数,并获得序列特异性较高的多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法制备多肽,并由此制备多克隆抗体,采用Indirect-ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,表明多克隆抗体可特异识别烟草HrBP。采用DIBA和Western blotting试验研究多克隆抗体对常见植物的抗原识别特性,发现多克隆抗体对这些植物的HrBP均有一定识别能力。此外,采用Real-time PCR和Indirect-ELISA等方法进行烟草各组织部位HrBP的表达量的研究,发现HrBP在各组织部位存在差异表达 %K Harpin结合蛋白 %K 生物信息学分析 %K 基因克隆表达 %K 多克隆抗体制备 %K 烟草组织差异表达 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6562.shtml