%0 Journal Article %T 人BMP4基因的克隆及其原核表达载体的构建 %A 刘秋英 %A 利奕成 %A 毛国梁 %A 熊盛 %A 王一飞 %A 钱垂文 %A 陈伟 %J - %D 2012 %X 摘要 以成熟人胎盘组织为材料来源,克隆人BMP-4基因的全长cDNA,经过PCR扩增后与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-BMP4克隆质粒。酶切后回收小片段与表达载体pET-22b的多克隆酶切位点连接,构建原核表达载体pET22b-BMP4,酶切及测序鉴定重组子。重组质粒转化至感受态的Rosseta宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果显示,从胎盘组织中成功地克隆到人BMP4基因,与NCBI中公布的序列100%相符合,原核表达载体pET22b-BMP4转化至Rosseta构建表达菌体,经IPTG诱导后电泳分析可见重组蛋白表达的条带 %K 骨形成蛋白4 %K 基因克隆 %K 原核表达 %K pMD18-T载体 %K pET-22b载体 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6355.shtml