%0 Journal Article %T 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TA-12株ORF6基因的克隆、鉴定及真核表达 %A 刘立涛 %A 李宁 %A 李心安 %A 李红梅 %A 汪晓飞 %A 王广文 %A 王方昆 %A 田国宁 %A 肖一红 %A 赵孝民 %A 王彤彤 %J - %D 2013 %X 摘要 旨在获得 HP-PRRSV TA-12(GenBank登录号:HQ416720)分离株ORF6蛋白的高效表达,将HP-PRRSV TA-12分离株的ORF6基因克隆到载体PfastBac HTB,并经转座进入E. coli含有杆状病毒质粒Bacmid的DH10BacTM细胞株,通过蓝白斑筛选和PCR鉴定出阳性重组杆粒,再将提取的重组杆粒Bacmid-ORF6转染昆虫细胞sf9,使其表达ORF6蛋白。经Western blot鉴定,在感染重组杆状病毒后第4天ORF6蛋白表达量最大,达到0.05 μg/μL。表达的ORF6蛋白主要存在于细胞质中 %K 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 %K ORF6蛋白 %K 真核表达 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract10056.shtml