%0 Journal Article %T 稳定表达非洲猪瘟病毒P54蛋白的Vero细胞系的建立 %A GrzegorzWozniakowski %A 冯春燕 %A 吴绍强 %A 杜方原 %A 林祥梅 %A 王勤 %A 王彩霞 %J - %D 2020 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-1099 %X 摘要 旨为建立稳定表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P54蛋白的Vero细胞系,将ASFV-P54基因与绿色荧光基因Azami Green的融合基因片段,将其克隆至慢病毒载体pLV-puro中构建重组慢病毒质粒pLV-ASFV-P54-AG,将该质粒与慢病毒包装质粒pH1和pH2共转染HEK-293V细胞,包装表达ASFV-P54蛋白的慢病毒。将重组慢病毒在聚凝胺(Polybrene)的介导下感染Vero细胞,筛选出一株稳定表达ASFV-P54蛋白的Vero细胞系,命名为Vero-AG-ASFV-P54。间接免疫荧光试验表明,该细胞系能够与P54多克隆抗体反应;经波兰国家兽医研究所进一步验证,结果显示,该细胞系与ASFV抗体阳性血清也能发生反应,并且与阴性血清无反应。结果表明,Vero-AG-ASFV-P54细胞系能够稳定高效的表达具有生物活性的ASFV-P54蛋白 %K 非洲猪瘟病毒 %K P54蛋白 %K Azami绿色荧光蛋白 %K Vero细胞 %K 慢病毒载体 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract12703.shtml