%0 Journal Article
%T 重组人βNGF在大肠杆菌中的可溶表达、纯化及活性鉴定
%A 王明灶
%A 章永垒
%A 葛平辉
%A 邹有土
%A 阮卡
%A 陈星
%A 陈胜亮
%A 马燕玲
%A 黄奋飞
%A 白羊
%J -
%D 2016
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.11.023
%X 摘要 旨在大肠杆菌中可溶表达重组人神经生长因子（Recombinant human β nerve growth factor,rhβNGF）,并对表达产物进行分离纯化和生物学活性鉴定。成功扩增hNGF β亚基基因,将其克隆入pMAL-c2X表达载体,构建了hβNGF-MBP的大肠杆菌表达体系并进行诱导表达,表达产物经纯化后以Factor Xa酶切去除麦牙糖结合蛋白（MBP）,Western blot鉴定后以TF-1细胞法检测生物学活性。结果显示,pMAL-c2X-hβNGF经酶切和测序证实构建正确,25℃、180 r/min、0.5 mmol/L IPTG诱导下可溶表达hβNGF-MBP融合蛋白。hβNGF-MBP经Factor Xa酶切后可去除MBP标签,SDS-PAGE分析纯化的hβNGF位于13 kD左右,纯度可达95%。Western blot鉴定为hβNGF,结果表明,比活约为1×106 U/mg。在大肠杆菌中成功可溶表达hβNGF,并具有较高的生物学活性
%K 人神经生长因子
%K 大肠杆菌
%K 可溶表达
%K 生物学活性
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract11333.shtml