%0 Journal Article
%T 双抗体夹心ELISA定量检测IFNβ-HSA融合蛋白方法的建立
%A 张立操
%A 张莲芬
%A 张雁云
%A 许正宏
%A 许泓瑜
%A 金坚
%A 陈其亮
%A 陈蕴
%A 雷楗勇
%J -
%D 2009
%X 摘要 为了建立β干扰素与人血清白蛋白融合蛋白(IFNβ-HSA)的酶联免疫定量分析方法,以抗IFNβ单克隆抗体为包被抗体,IFNβ-HSA融合蛋白为夹心抗原,辣根过氧化酶(HRP)标记抗HSA单克隆抗体为检测抗体,建立了一种定量测定IFNβ-HSA融合蛋白的双抗体夹心ELISA方法。并进行了检测限、精密度、准确度和稳定性等方法学考核。结果表明,包被抗体和检测抗体的最佳工作浓度均为2μg/ml,抗原浓度在51.88～3320ng/ml范围内呈良好线性关系,相关系数R2>0.99,检测限为10ng/ml。经方法学考核,批内、批间变异系数分别为4.86%和8.08%,回收率为91.9%～110.4%,与IFN-β、IFN-α、HSA、IFNα2b-HSA基本无交叉反应,健全性分析表明发酵液稀释倍数对该方法无影响,8d连续检测标准曲线表明稳定性良好。这种定量检测IFNβ-HSA融合蛋白的双抗体夹心ELISA方法,灵敏度高,重复性好,为当前融合蛋白发酵优化、分离纯化研究提供了定量检测的方法,并为后期药代动力学、临床研究提供了思路和备选方法
%K 双抗体夹心
%K 酶联免疫分析
%K β干扰素
%K 人血清白蛋白
%K 融合蛋白
%K 定量分析
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract4772.shtml