%0 Journal Article
%T 人β2-glycoprotein I及其第V结构域蛋白的原核表达、纯化和活性鉴定
%A 刘庆平
%A 李敬达
%A 李文哲
%A 王仁军
%A 迟彦
%A 马艳华
%A 李敬达
%A 李文哲
%A 王仁军
%A 王贺
%A 迟彦
%A 马艳华
%J -
%D 2011
%X 目的:旨在重组表达人源β2-GPI及其第V结构域基因,探讨后者在抗自身免疫性动脉粥样硬化实验中的干预作用。方法:以实验室保存的CTA727-1重组质粒为模板克隆β2-GPI及其第V结构域基因,构建pET32-β2-GPI和pET32-DV重组表达载体,分别转化至大肠杆菌Rosetta-gami。经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白,并采用Western blot、HPTLC和ELISA方法验证了重组蛋白的活性与功能。结果:β2-GPI及其第V结构域目的基因被分别克隆至原核表达载体pET-32a-c(+),诱导出具备CL和oxLig-1结合活性的β2-GPI 及第V结构域融合蛋白,ELISA实验显示第V结构域融合蛋白可抑制oxLig-1/(r)β2-GPI/Antibody免疫复合物的形成。结论:成功构建了pET32-β2-GPI及pET32-DV表达载体,获得高水平表达且具备活性的β2-GPI 和第V结构域重组蛋白,为研究治疗动脉粥样硬化等疾病的多肽药物奠定了基础
%K β<sub>2</sub>-GPI
%K β<sub>2</sub>-GPI及第V结构域
%K 原核表达
%K 动脉粥样硬化
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract4981.shtml