%0 Journal Article
%T 大肠杆菌YggG与结合蛋白Era的相互作用研究
%A 梅其炳
%A 陈苏民
%A 黄勇
%A 黄勇 陈苏民 黄庆生 梅其炳
%A 黄庆生
%J -
%D 2009
%X Era是细菌生长必须的一高度保守的GTPase。yggG是从大肠杆菌全基因组文库中钓取并克隆的Era结合蛋白基因，进一步的研究表明该基因在大肠杆菌中的表达与环境应激相关，提示yggG基因产物参与细菌的应激调控。为了阐明YggG蛋白与Era蛋白间的相互关系，利用所构建的双启动子表达载体pDH2-YggG-Ptac-Era在同一细胞中同时表达YggG与Era蛋白，并通过免疫共沉淀实验检测细菌裂解产物YggG与Era蛋白间的相互作用；在此基础上，构建并表达纯化了GST融合的Era蛋白氨基端截短肽和Era羧基端截短肽，通过GST Pull-down检测了Era不同功能区域与YggG蛋白间的相互作用。结果显示， Era/YggG 复合物仅存在于同时过表达Era和YggG蛋白的细菌细胞内，不诱导Era或者不诱导YggG蛋白过表达，均检测不到Era/YggG 复合物存在；纯化的GST不能Pull-down YggG蛋白，而纯化的GST融合的Era蛋白、Era氨基端截短肽及Era羧基端截短肽均可以Pull-down YggG蛋白；GST融合Era氨基端截短肽和GST融合的Era蛋白对YggG蛋白结合作用明显高于GST融合的Era蛋白羧基端截短肽。上述结果说明，YggG是一大肠杆菌Era结合蛋白，YggG与Era的氨基端和羧基端的结合活性存在差异
%K 大肠杆菌
%K Era
%K YggG
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract2146.shtml